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NEST 801007 爬片 24孔 適用于細胞培養(yǎng)板 100個/包

NEST 801007 爬片 24孔 適用于細胞培養(yǎng)板 100個/包

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報    價: 230
更新時間: 2023-08-14
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NEST 801007 爬片 24孔 適用于細胞培養(yǎng)板 100個/包致力于向客戶提供*的產(chǎn)品、*化的解決方案和高品質(zhì)的專業(yè)服務(wù),并承擔起生物科學產(chǎn)業(yè)助推器的歷史使命,服務(wù)并推動生命科學事業(yè)的發(fā)展。

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NEST 801007 爬片 24孔 適用于細胞培養(yǎng)板 100個/包

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NEST 801007 爬片 24孔 適用于細胞培養(yǎng)板 100個/包

商品名稱:爬片

商品貨號:801007

品牌:耐思  NEST

規(guī)格:100個/包

一、爬片的準備

        1.爬片可用一般的蓋玻片,也可用爬片;本公司*的爬片不防一試,適合多種細胞的爬片。

        2.應(yīng)用蓋玻片,可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小,以備置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪,或者是口腔科的那種小沙輪,輕輕劃一下后,稍用力一掰就分開了。 如果接種大皿的話,我一般不將蓋玻片切開,直接清潔后放入培養(yǎng)皿中,到染色時再將之切開,這樣既保證了細胞均一性,又可同時做幾個指標的染色。

        3.將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并guoye,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸泡6小時,再用三蒸水沖洗3遍(個人認為主要目的是將酸沖洗干凈就可以了,如果不干凈的話,細胞帖壁不好),放在飯盒或者玻璃培養(yǎng)皿中烘干后進行高壓消毒。

        4.高壓后取出放入烤箱中烤干,備用。烤干后可放入超凈臺中。

        5.關(guān)于多聚賴氨酸,很多人都將玻片用此處理,以使細胞與玻片結(jié)合更牢。但我在做爬片時從來沒用過多聚賴氨酸,細胞貼壁仍然很好,且在做后續(xù)的免疫細胞化學染色、TUNEL等凋亡檢測、免疫熒光等也從未脫過片。

  二、細胞爬片

        1.胰酶消化細胞后計數(shù)重懸細胞于*培養(yǎng)基中。

        2.加細胞時,根據(jù)玻片的大小,先在每個孔里準備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基,目的是使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起,然后放玻片,防止加細胞懸液時玻片漂起,造成雙層細胞貼片。整個過程注意無菌操作。

        3.根據(jù)自己的需要選擇合適的細胞密度種入培養(yǎng)板內(nèi)即可

        4.待細胞貼壁后,可去上清加含藥培養(yǎng)基。

        5.按照實驗設(shè)計,作用一定時間后取玻片。取玻片時由于玻片與培養(yǎng)皿底結(jié)合較緊,張力較大,我一般將注射器針頭針尖向背面弄個小鉤,這樣將爬片輕輕勾起,用小鑷子取出就可以了。如果要做諸如24h,48h,72h等這樣時間點的實驗的話,將所需數(shù)量的爬片取出時應(yīng)用酒精燈火焰燒一下針頭和鑷子。末取出的可接著繼續(xù)培養(yǎng)。

 三、細胞爬片的固定

          細胞爬片取出后,一般用PBS洗2遍,然后再做固定。當然,根據(jù)研究目的,PBS洗也不是一定要做的,比如做凋亡的TUNEL染色時就避免洗,因為凋亡的細胞在洗的過程中有可能會脫落。

         另外在保存細胞爬片的時候,我一般用培養(yǎng)皿或板,先在皿底放一層面巾紙,然后再放爬片,這樣方便做實驗時取片。然后蓋上蓋子,并在蓋子上做標記,為避免混淆,可用透明膠帶將蓋子和皿連在一起。一般-20℃保存2-3個月的片子做免疫組化是沒有問題的。


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